1、可溶性蛋白，浓度最好在1–5mg/ml之间，最小不得低于0.5mg/ml。

　　2、胶免疫蛋白要求必须磨细，能顺利通过6#针头（或一次性5ml注射器的针头），经考马斯亮蓝染色的胶，需脱色，并将冰醋酸洗掉，含免疫蛋白（2mg以上）的胶的体积尽量控制在2ml以内，还需要提供可溶性蛋白用于抗体的筛选。

　　3、多肽、氨基酸片段需偶联载体，用多肽（氨基酸片断）与载体偶联的蛋白进行小鼠免疫，用多肽（氨基酸片断）进行筛选。如多肽（氨基酸片断）不能进行抗体筛选，需再偶联另一种载体进行筛选。（载体一般为KLH、GST、BSA等。）

　　4、不论注射何种状态蛋白，均不应含有叠氮钠、咪唑、尿素或其它有毒有害刺激性大的物质。甘油含量应低于20%。

　　5、需要大于等于3mg的蛋白。

　　6、蛋白的纯度大于90%。

　　7、分子量小于20KD的蛋白免疫效果可能不理想。

　　8、变性蛋白免疫产生的抗体跟天然蛋白有可能不发生抗原抗体反应。