一、简介
单克隆抗体技术是在1975年由Kohler和Milstein发现,将小鼠骨髓瘤细胞和小鼠脾细胞进行融合,形成的杂交细胞既可产生抗体,又可无限增殖。单克隆抗体制备流程包括动物免疫、细胞融合、筛选杂交瘤、检测抗体、杂交瘤细胞的克隆化、冻存以及单克隆抗体的大量生产。
动物中心在2004年建立单抗制备平台,多年为各大高校、科研院所和公司生产各种高品质单克隆抗体,抗体生产技术人员拥有专业的技术知识和多年的抗体制备经验。
三、服务和承诺
我们承诺操作流程标准化,并及时报告实验进度与实验数据。其产品效价高、特异性强、稳定性好。适用于免疫共沉淀、免疫组化、Western Blot、ELISA等各种免疫学实验。
四、抗原要求
1、可溶性蛋白,浓度最好在1–5mg/ml之间,最小不得低于0.5mg/ml。
2、胶免疫蛋白要求必须磨细,能顺利通过6#针头(或一次性5ml注射器的针头),经考马斯亮蓝染色的胶,需脱色,并将冰醋酸洗掉,含免疫蛋白(2mg以上)的胶的体积尽量控制在2ml以内,还需要提供可溶性蛋白用于抗体的筛选。
3、多肽、氨基酸片段需偶联载体,用多肽(氨基酸片断)与载体偶联的蛋白进行小鼠免疫,用多肽(氨基酸片断)进行筛选。如多肽(氨基酸片断)不能进行抗体筛选,需再偶联另一种载体进行筛选。(载体一般为KLH、GST、BSA等。)
4、不论注射何种状态蛋白,均不应含有叠氮钠、咪唑、尿素或其它有毒有害刺激性大的物质。甘油含量应低于20%。
5、需要大于等于3mg的蛋白。
6、蛋白的纯度大于90%。
7、分子量小于20KD的蛋白免疫效果可能不理想。
8、变性蛋白免疫产生的抗体跟天然蛋白有可能不发生抗原抗体反应。
五、制备流程
六、服务流程
1、填写单抗登记表。
2、送抗原,沟通后进行制备。
3、制备时间一般为6个月,最后交付5ml腹水及细胞株。
联系人:王丹 联系方式:东楼办公室010-648078801013
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